前言
上篇生物化學(xué)實驗方法和技術(shù)原理
第一章生物化學(xué)分離方法
第一節(jié)離心技術(shù)
一、離心沉降速率影響因素
二、沉降系數(shù)
三、離心設(shè)備
四、制備超離心法
第二節(jié)層析技術(shù)
一、薄層層析
二、聚酰胺薄膜層析
三、凝膠層析
四、離子交換層析
五、親和層析
六、氣相色譜
七、高效液相色譜
第三節(jié)電泳技術(shù)
一、影響電泳的主要因素
二、常用電泳支持介質(zhì)
三、聚丙烯酰胺凝膠盤狀電泳
四、連續(xù)密度梯度電泳
五、SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳
六、等電聚焦電泳
七、雙向凝膠電泳
八、毛細(xì)管電泳
九、電泳新技術(shù)
十、電泳相關(guān)技術(shù)
第四節(jié)膜分離技術(shù)
一、膜的分類
二、膜的性能
三、膜的使用壽命
四、膜的分離技術(shù)
第二章生物化學(xué)分析方法
第一節(jié)重量法
第二節(jié)化學(xué)法
第三節(jié)分光光度法
第四節(jié)酶法
一、化學(xué)方法
二、儀器方法
第五節(jié)色譜法
第六節(jié)主要生物物質(zhì)分析
一、碳水化合物分析
二、核酸分析
三、蛋白質(zhì)分析
第三章生物化學(xué)制備方法
第一節(jié)生物化學(xué)制備方法的特點
第二節(jié)溶劑提取法
第三節(jié)沉淀法
一、鹽析法
二、有機(jī)溶劑沉淀法
三、非離子多聚物沉淀法
第四節(jié)濃縮與干燥
第五節(jié)超臨界流體萃取
第六節(jié)萃取與相分離
第七節(jié)結(jié)晶
第四章生物化學(xué)代謝研究方法
中篇生物化學(xué)實驗
第一單元基礎(chǔ)訓(xùn)練
實驗一生化實驗要求及基本實驗設(shè)備識知
實驗二植物試材水分測定和干樣制備
實驗三高等植物材料丙酮粉的制備
實驗四緩沖溶液的配制和氨基酸兩性性測定
實驗五分光光度計線性分辨范圍測定
第二單元基本實驗
實驗六酶的基本性質(zhì)
實驗七轉(zhuǎn)氨酶活性鑒定(薄層層析法)
實驗八淀粉酶活力測定
實驗九脲酶Km值測定
實驗十蛋白質(zhì)的水解和氨基酸的紙層析法分離
實驗十一蛋白質(zhì)的兩性性質(zhì)及等電點的測定
實驗十二蛋白質(zhì)含量測定(考馬斯亮藍(lán)G—250法)
實驗十三還原糖和總糖含量的測定(3,5—二硝基水楊酸比色法)
實驗十四丙酮酸含量的測定
實驗十五抗壞血酸含量測定(2,6—二氯酚靛酚法)
第三單元重點實驗
實驗十六脂肪含量的測定及高級脂肪酸組分分析(氣相色譜法)
實驗十七單核苷酸的離子交換柱層析分離
實驗十八RuBP羧化酶—加氧酶的純化
實驗十九連續(xù)密度梯度電泳法測定蛋白質(zhì)的分子質(zhì)量及純度
實驗二十過氧化物酶同工酶聚丙烯酰胺凝膠圓盤電泳
實驗二十一雙向免疫擴(kuò)散試驗
實驗二十二質(zhì)粒DNA的提取、酶切及電泳鑒定
實驗二十三高等植物DNA的提取和純度鑒定
實驗二十四酵母蛋白質(zhì)和RNA的制備(稀堿法)
實驗二十五酵母RNA的提制(濃鹽法)
實驗二十六多酚氧化酶的制備和化學(xué)性質(zhì)
第四單元綜合實驗
實驗二十七種子蛋白質(zhì)系統(tǒng)分析
實驗二十八果實菠蘿蛋白酶的動力學(xué)測定
實驗二十九苯丙氨酸解氨酶的純化及活性測定
第五單元選擇實驗
實驗三十蛋白質(zhì)含量測定(雙縮脲法)
實驗三十一蛋白質(zhì)含量測定(Foliri—酚法)
實驗三十二紫外吸收法測定蛋白質(zhì)含量
實驗三十三還原糖含量的測定(Somogyi—Nelson比色法)
實驗三十四可溶性總糖的測定(蒽酮比色法)
實驗三十五可溶性總糖的測定(地衣酚—硫酸法)
實驗三十六直鏈淀粉和支鏈淀粉的測定(雙波長法)
實驗三十七粗纖維的測定(酸性洗滌劑法)
實驗三十八果膠質(zhì)含量測定(重量法)
實驗三十九1398中性蛋白酶活性的測定
……
實驗四十谷物種子中賴氨酸含量的測定
實驗四十一甲醛滴定法測定氨基氮
實驗四十二醋酸纖維薄膜電泳分離核苷酸
實驗四十三蛋白質(zhì)脫鹽(透析和凝膠過濾)
實驗四十四葉綠素含量測定(分光光度法)
實驗四十五質(zhì)膜透性與抗旱性鑒定(連續(xù)升溫電導(dǎo)法)
下篇附錄
一、實驗室安全及防護(hù)知識
二、Union Carbide各種型號透析管的滲透范圍
三、Sepctro por再生纖維素膜透析袋的數(shù)據(jù)
四、纖維素酯膜透析袋的數(shù)據(jù)
五、Amicon圓形超濾膜的規(guī)格和有效過濾面積的數(shù)據(jù)
六、Amicon圓形超濾膜的流速
七、硫酸銨飽和度的常用表
八、緩沖溶液的配制方法
九、凝膠數(shù)據(jù)表
十、凝膠過濾用標(biāo)準(zhǔn)蛋白
十一、薄層層析分離各類物質(zhì)常用的展層溶劑
十二、各類物質(zhì)常用的薄層顯色劑
十三、腐蝕性萬能薄層顯色劑
十四、電泳染色方法
十五、實驗誤差與提高實驗準(zhǔn)確度的方法
十六、常用儀器使用方法