本書主要對化學生物學的一些重要實驗技術進行講解。全書包括6個實驗,分別介紹化學生物學學科中6種重要的實驗技術及其涉及的背景知識,包括蛋白質(zhì)的合成與小分子調(diào)控、利用生物分子誘導化學反應、藥物靶點的發(fā)現(xiàn)與鑒別以及活體標記和熒光成像技術等。
前言
實驗1 生物大分子的固相合成與質(zhì)譜分析
1.1 背景知識
1.1.1 生物大分子及其獲取方法
1.1.2 多肽固相合成流程
1.1.3 生物大分子的質(zhì)譜分析
1.2 實驗設計
1.3 實驗操作
1.3.1 儀器試劑
1.3.2 實驗步驟
1.4 分析討論
1.4.1 氨基酸偶聯(lián)時間對產(chǎn)率的影響
1.4.2 切割時間的影響
1.4.3 多肽粗產(chǎn)品的分離
1.4.4 其他方法
1.5 總結與思考題
參考文獻
實驗2 蛋白質(zhì)連接反應與蛋白質(zhì)半合成
2.1 知識背景
2.1.1 蛋白質(zhì)生物表達的基本原理
2.1.2 蛋白質(zhì)半合成基本原理
2.1.3 Intein基本原理
2.2 實驗設計
2.3 實驗操作
2.3.1 儀器試劑
2.3.2 實驗步驟
2.4 分析討論
2.4.1 Intein融合蛋白的表達效率
2.4.2 脫鹽效率對Ub-AMC活性的影響
2.5 總結與思考題
參考文獻
實驗3 非天然氨基酸的定點嵌入與標記
3.1 背景知識
3.1.1 合成生物學
3.1.2 天然蛋白質(zhì)中引入非天然氨基酸的基本原理
3.1.3 含有非天然氨基酸蛋白質(zhì)的應用
3.2 實驗設計
3.3 實驗操作
3.3.1 儀器試劑
3.3.2 實驗步驟
3.4 分析討論
3.4.1 引入非天然氨基酸蛋白質(zhì)的表達效率
3.4.2 脫鹽對點擊化學反應的影響
3.5 總結與思考題
參考文獻
實驗4 DNA模板控制的點擊化學反應
4.1 背景知識
4.1.1 DNA
4.1.2 核酸編碼文庫
4.1.3 核酸模板控制的化學反應
4.2 實驗設計
4.3 實驗操作
4.3.1 儀器試劑
4.3.2 實驗步驟
4.4 分析討論
4.5 總結與思考題
參考文獻
實驗5 蛋白質(zhì)聚集及小分子對其抑制作用
5.1 背景知識
5.1.1 蛋白質(zhì)的結構生物學
5.1.2 蛋白質(zhì)結構與重要人類疾病的關系
5.1.3 Tau蛋白介導阿爾茲海默癥的機理及相關藥物
5.2 實驗設計
5.3 實驗操作
5.3.1 儀器試劑
5.3.2 實驗步驟
5.4 分析討論
5.5 總結與思考題
參考文獻
實驗6 小分子探針在藥物靶點鑒定中的應用
6.1 背景知識
6.1.1 基于活性的蛋白質(zhì)譜學方法
6.1.2 小分子調(diào)控蛋白活性
6.2 實驗設計
6.3 實驗操作
6.3.1 儀器試劑
6.3.2 實驗步驟
6.4 分析討論
6.4.1 實驗設計及教學安排
6.4.2 熒光基團性質(zhì)對實驗結果的影響
6.5 總結與思考題
參考文獻